簡要描述:
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)測試盒存在于細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,調(diào)控細(xì)胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進(jìn)而提高植物食品的營養(yǎng)品質(zhì)。
更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1013
商品詳情:
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)測試盒測定意義:
DHAR存在于細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,調(diào)控細(xì)胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進(jìn)而提高植物食品的營養(yǎng)品質(zhì)。
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3468 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3468-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA減少速率,計(jì)算DHAR活性。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
樣品中AA提取:
1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計(jì)算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:
單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
43kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP43免費(fèi)代測試劑
3-羥基異丁脫氫酶ELISA試劑盒 HIBADH免費(fèi)代測試劑
3-羥基丁脫氫酶2ELISA試劑盒 BDH2免費(fèi)代測試劑
3-羥基丁脫氫酶1ELISA試劑盒 BDH1免費(fèi)代測試劑
37kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP37免費(fèi)代測試劑
35kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP35免費(fèi)代測試劑
3',5'-二磷核苷酶1ELISA試劑盒 BPNT1免費(fèi)代測試劑
2-氨基乙硫chun雙加氧酶ELISA試劑盒 ADO免費(fèi)代測試劑
26S-體ELISA試劑盒 26S-PSM免費(fèi)代測試劑
24-脫氫還原酶ELISA試劑盒 DHCR24免費(fèi)代測試劑
214kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP214免費(fèi)代測試劑
205kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP205免費(fèi)代測試劑
2',5'-寡腺苷合成酶3ELISA試劑盒 OAS3免費(fèi)代測試劑
2',5'-寡腺苷合成酶2ELISA試劑盒 OAS2免費(fèi)代測試劑
188kDa核孔蛋白ELISA試劑盒 NUP188免費(fèi)代測試劑
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)測試盒50管/24樣抗酒石性磷酶(StrACP)測試盒/比色法
50T/48S考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測試盒/分光光度法
100T/96S考馬斯亮藍(lán)法蛋白含量測試盒/微量法
25管/24樣可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒/分光光度法
50管/48樣可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒/分光光度法
100管/96樣可溶性淀粉合成酶(SSS)測試盒/微量法
50管/24樣可溶性性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)測試盒/分光光度法
100管/48樣可溶性性轉(zhuǎn)化酶(S-AI)測試盒/微量法
50T/48S賴氨(LYS)測試盒/分光光度法