簡要描述:
植酸酶測試盒是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環境的污染,改善營養成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應用價值。
更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:847
商品詳情:
植酸酶測試盒測定意義
植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環境的污染,改善營養成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應用價值。
貨號 | 規格 | 檢測方法 |
YSH3533 | 100管/48樣 | 微量法 |
YSH3533-1 | 50管/24樣 | 可見分光光度法 |
測定原理
植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物,在700nm處有特征吸收峰,根據700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。
樣品中AA提取:
1.按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行室溫勻漿,然后轉移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測。
2.細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3.血清等液體:直接檢測。
計算公式如下:
1、血清(漿)LAP活力的計算:
單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細菌或細胞中LAP活力的計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算:
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算:
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
(3)按細菌或細胞密度計算:
單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:對硝基苯胺摩爾消光系數,9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;2000:細菌或細胞總數,2000萬。
注意事項:
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標準品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內使用完畢。
2. 為保證實驗結果的準確性,需先取1-2個樣做預實驗,如果測定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測定結果不含這兩種氨基酸的量。
4.檢出限為100μmol/L。
血管緊張suⅡ受體Ⅰa型檢測試劑盒 AgtrⅠa ELISA Kit
血管緊張suⅡ受體2抗體檢測試劑盒 AT2R-Ab ELISA Kit
血管緊張suⅡ受體1抗體檢測試劑盒 ATⅡR1 ELISA Kit
血管緊張suⅠ受體抗體檢測試劑盒 ANG-ⅠR ELISA Kit
血管緊張su檢測試劑盒 ANG ELISA Kit
血管活性肽酶抑制劑檢測試劑盒 VPI ELISA Kit
旋毛蟲抗體檢測試劑盒 Trichinella Ab ELISA Kit
雄激su結合蛋白檢測試劑盒 ABP ELISA Kit
胸腺依賴性抗原檢測試劑盒 TD-Ag ELISA Kit
五肽檢測試劑盒 TP-5 ELISA Kit
檢測試劑盒 Thymosin ELISA Kit
胸腺非依賴性抗原檢測試劑盒 TI-Ag ELISA Kit
胸腺白血病抗原檢測試劑盒 TLa ELISA Kit
性別決定區Y蛋白檢測試劑盒 SRY ELISA Kit
信號識別顆粒抗體檢測試劑盒 SRP ELISA Kit
植酸酶測試盒100管/96樣含量測試盒/微量法
50管/48樣脫氫酶(SH)測試盒/分光光度法
100管/96樣脫氫酶(SH)測試盒/微量法
50T/48樣脫氫酶測試盒/比色法
50管/48樣生物堿含量測試盒/分光光度法
100管/96樣生物堿含量測試盒/微量法
50管/48樣食品中亞硝鹽含量測試盒/分光光度法
100T/96S食品中亞硝鹽含量測試盒/微量法
50T/48S雙縮脲法蛋白含量測試盒/分光光度法