久在草影院-久在草视频-久月婷婷-久伊人网-久视频在线观看久视频-久视频在线

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒操作步驟
綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒操作步驟
更新時間:2024-12-24   點擊次數:202次

綿羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒操作步驟:

1.液氮充分研磨樣品。

2.收集研磨成粉末的50mg樣品,置于1.5ml離心管中。

3.加入350μl65℃預熱的緩沖液IL,并加入20μl蛋白酶K劇烈地漩渦振蕩,確保所有的組織團都分散均勻。

4.65℃水浴20-30min。水浴期間顛倒樣品數次。

5.加入350μl氯仿,充分混勻,12,000 rpm(~13,400×g)離心5分鐘。

6.小心地把上清液吸至另一新的1.5ml離心管中。注意確保不要打散沉淀團或把組織碎片也一起轉移。

7.加入4μl RNase A,渦旋混勻。室溫放置2min。

8.加入二分之一上清體積的緩沖液IB與等體積的無水乙醇,充分混勻。如:向300μl上清中加入150μl緩沖液IB與300μl無水乙醇。

9.把上述混勻的液體轉移到吸附柱上。10,000×g離心1 min以結合DNA,棄去濾出液體。純化柱*容量為750μl,如果混合液大于750μl,請分兩次過柱。

10.將吸附柱重新套回收集管中,加入500μl緩沖液WB至柱子中,10,000×g離心1min,倒棄流出液;

11.將吸附柱重新套回收集管中,加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,10,000×g離心1min,倒棄流出液;

注意:DNA Wash Buffer使用前須按要求用無水乙醇稀釋。如果放入冰箱中,使用前須恢復到室溫。

12.再加入600μl DNA Wash Buffer至柱子中,8,000×g離心1min,棄去流出液;

13.將吸附柱重新套回2ml收集管中,轉速(>13000×g)離心空結合柱1min以干燥柱子的基質;這一步對下面的洗脫步驟至關重要。

14.將柱子置于1.5ml滅菌離心管,加入50-150μl65℃預熱的洗脫緩沖液EB至柱子的膜中央。室溫靜置5min;

15. 室溫下,離心(>13000)1min,以洗脫DNA。保留含DNA的流出液。將DNA儲于-20℃。


 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 久久婷婷丁香五月色综合啪免费 | 欧美激情综合 | 国产精品第3页 | 日韩影院在线观看 | 国产白白视频在线观看2 | 亚洲AV久久无码精品蜜桃 | 亚洲sss综合天堂久久久 | 天海翼黄色三级 | 草莓污污| 九九久久国产精品免费热6 九九精品视频一区二区三区 | 亚洲另类第一页 | 婷婷色天使在线视频观看 | 护士被多人调教到失禁h | 冰雪奇缘1完整版免费观看 变形金刚第一部 | 99草精品视频 | 湖南美女被黑人4p到惨叫 | 91麻豆精品国产91久久久 | 久久91精品国产91久久户 | 青青青手机视频 | 女人扒开下面让男人桶爽视频 | 精品在线免费观看视频 | 青草色视频| yy6080久久国产伦理 | 激情小视频网站 | 99热这里只有精 | 欧美18~20性hd | 国产综合成人亚洲区 | 99精品国产久热在线观看66 | 99热色 | 国产精品久久久久久久久久久久 | 亚洲日本va中文字幕 | 国内精品久久久久香蕉 | www免费视频com | 色哟呦 | 91久久国产成人免费观看资源 | 99视频九九精品视频在线观看 | 欧美久久久久久久一区二区三区 | 精品精品久久宅男的天堂 | 久久青青草原精品国产软件 | 四虎海外影院 | 久久99国产精品二区不卡 |