PCR檢測試劑盒在使用時可有什么要領
PCR檢測試劑盒采用聚合酶鏈式反應(PCR)技術檢測,可用于檢測各種待檢標本(如血液、糞便、食物、生物材料等)中所感染的特定細菌或病毒的某一特定基因,進而確定該細菌或病毒的感染/污染狀態(tài)。試劑盒中所含引物能特異性擴增該細菌或者病毒的保守區(qū)域,不會交叉擴增細胞基因組。與傳統(tǒng)的選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)檢測方法和免疫血清學檢測方法相比較,本方法更為快速,特異性更高。
PCR檢測試劑盒引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
PCR檢測試劑盒的使用要領:
①開始檢測前請仔細閱讀該產品簡介全文。
②操作時應盡量避免說話,以免引起樣品污染,而造成假陽性。
③整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行,以避免交叉污染。
④盡量使用一次性材料,包括過濾芯吸頭,EP試管,橡膠手套等。
⑤實驗時,試劑盒組成中的試劑除酶外使用前應置4℃提前融化(混勻時禁止激烈振蕩),酶始終置于-20℃保存。
⑥檢測反應管中加入所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免擴增冷啟動及形成過多的二聚體。
⑦保存:-20℃,保質期一年。