小鼠纖連蛋白(FN)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品*終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
phospho-Androgen Receptor (Ser213)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser650)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-AKT1+2+3 (Tyr315+316+312) 磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體
phospho-AKT1(Thr34)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-ATF2(Ser472)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
3-Apr凋亡相關(guān)蛋白3抗體
ATG18自噬相關(guān)蛋白18抗體
ATG4A自噬相關(guān)蛋白4A抗體
APOA4載脂蛋白A4抗體
ALOX1212脂氧合酶抗體
Angiotensin III血管緊張素III抗體
ADCY3腺苷酸環(huán)化酶3抗體
Angiomotin血管動(dòng)蛋白抗體
Adenovirus 5 E1A腺病毒早期E1A蛋白抗體
phospho-ATF2 (Ser44)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATF2 (Ser94)磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
phospho-ATXN1(Thr236)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體
ANKRD17錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體
ALDH1A1胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體
ARL3ADP核糖基化樣因子ARL3抗體
15 Lipoxygenase 1花生四烯酸15脂氧合酶1抗體
ABC2乳腺癌增強(qiáng)蛋白2抗體
Alpha 1 microglobulinα1微球蛋白抗體