久在草影院-久在草视频-久月婷婷-久伊人网-久视频在线观看久视频-久视频在线

技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素
解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素
更新時間:2021-05-19   點擊次數(shù):825次

解沒食子酸鏈球菌PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

化工儀器網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站
主站蜘蛛池模板: 免费一级欧美片在线观看 | a∨79成人网 | 亚洲国产精品久久久久久网站 | 欧美男同video | 俺去啦最新| 8x8x丝袜美女| 国产特级毛片aaaaaa | 美女靠逼动漫 | 国产精品原创永久在线观看 | 男人使劲躁女人视频免费 | 日本护士xxxx视频免费 | 国产成人永久免费视 | 亚洲国产天堂久久精品网 | 精品国产品香蕉在线观看 | 师尊被各种play打屁股 | 韩国三级日本三级香港三级黄 | 色戒完整版2小时38分钟 | 国产成人久久久精品一区二区三区 | 深夜免费看 | 亚洲欧美综合区自拍另类 | chinese调教踩踏视频 | 午夜dj影院在线视频观看完整 | 无耻三级在线观看 | 免费毛片 | 黄在线观看www免费看 | 午夜在线观看免费完整直播网页 | 麻生希在线观看 | 日韩成人在线网站 | 草草视频在线观看最新 | 碰91精品国产91久久婷婷 | 久草在线福利资站免费视频 | 成人日b视频 | 国产成人亚洲综合a∨婷婷 国产成人亚洲精品乱码在线观看 | 亚洲成在人线久久综合 | 亚洲精品无码不卡 | 欧美日韩国产成人综合在线影院 | 青春学堂在线观看 | 97色伦| 日本深夜视频 | 欧美一区二区日韩一区二区 | 国产一区二区三区久久精品 |